Ömür A. D. (Yürütücü), Acısu T. C., Çelebi Ö., Koca R. H., Apaydın Yıldırım B., Akarsu S. A., et al.
TÜBİTAK Projesi, 2023 - 2024
Sperma sulandırıcılarına patojen mikroorganizmalara karşı
çeşitli antibiyotik maddeler eklenmektedir. Ancak eklenen bu antibiyotikler
spermatozoonlar üzerinde yan etki gösterebilmekte ve bu işlemden sonra sperma
kalitesinde bir düşüş gözlemlenebilmektedir. Bu yüzden planlanan çalışmada,
boğa sperma sulandırıcısına probiyotik grubunda yer alan Lactobacillus
rhamnosus (LR), Lactobacillus acidophilus (LA) ve Bifidobacterium longum (BL)
eklenerek spermanın dondurulma çözdürülme sonrası kalitesi üzerine etkisinin
belirlenmesi amaçlanmaktadır. Bu maksatla Atatürk Üniversitesi Gıda ve
Hayvancılık Uygulama ve Araştırma Merkezi'nde bulunan 4 adet erkek boğadan
sperma alınacaktır. Alınan sperma ilk önce motilite yönünden kontrol edilecek,
sperma kalitesi uygun olan ejekülatlar pooling yapılmadan ayrı ayrı
değerlendirilerek spermanın sulandırılması ve dondurulması işleminde
kullanılacaktır. Çalışmada gruplar şöyle dizayn edilecektir: kontrol grubu,
antibiyotiksiz kontrol grubu, LR grubu, LA grubu ve BL grubu. Kontrol grubunda
antibiyotik kullanılacak, antibiyotiksiz kontrol grubu oluşturulacak,
probiyotik gruplarına antibiyotik kullanılmayacaktır. Sulandırma işlemi ve
gruplara göre probiyotik ilavesini
takiben sperma numuneleri 0.25 ml’lik payetlere çekilerek yaklaşık 3
saat +5oC’ta ekilibrasyona bırakılacak ve ekilibrasyonu izleyen
süreçte sıvı azot buharında (~-100oC), 10 dakika dondurularak -196oC’taki
sıvı azotta saklanacaktır. En az bir hafta sıvı azotta bekletilen dondurulmuş
sperma örnekleri 37 oC’de 25 sn süre ile çözdürülerek analizler
yapılacaktır. Çözdürülen spermada CASA parametreleri ile spermanın kalitesi
değerlendirilecektir. Floresan boyalar ile DNA hasarı, akrozomal bütünlük,
mitokondriyel membran potansiyeli tespit edilecek olup oksidatif stres parametreleri,
miRNA ekspresyon düzeyleri, TRPM3, Star, TGF-β ve Caspase-3 anlamında analiz yapılacaktır. Elde edilen
veriler SPSS (IBM SPSS Statistics, 26 V) programı ile analiz edilecektir.
Projeden istenilen sonuçların alınmasıyla sperma sulandırıcılarına eklenen
antibiyotiklerden kaynaklı zararlı etkinin önüne geçilerek probiyotik özellik
gösteren bakterilerin kullanımı ile ilgili tartışma süreci başlayacaktır.