IN SITU HYBRIDIZATION METHOD

Creative Commons License

Gezer A., Karadağ Sarı E.

HEALTH SCIENCES RESEARCH PAPERS, İbrahim ÇALTEKİN,Melike ÇALTEKİN, Editör, Gece Kitaplığı Yayınevi, Ankara, ss.1-9, 2019

  • Yayın Türü: Kitapta Bölüm / Araştırma Kitabı
  • Basım Tarihi: 2019
  • Yayınevi: Gece Kitaplığı Yayınevi
  • Basıldığı Şehir: Ankara
  • Sayfa Sayıları: ss.1-9
  • Editörler: İbrahim ÇALTEKİN,Melike ÇALTEKİN, Editör
  • Atatürk Üniversitesi Adresli: Evet

Özet

ÖZET

İn situ hibridizasyon (ISH) tekniği 1969 yılında tanımlanmış, 1981’de RNA molekülüne uygulanmıştır. Belirli bir nükleik asit dizisinin hücre içerisinde ya da dokuda bulunduğu yeri tespit etmek amacıyla kullanılan bu teknik; özel RNA veya DNA dizilerine bağlanabilen, tamamlayıcı ve işaretli RNA/DNA nükleik asit ipliklerinin kullanıldığı (melezleme) hibridizasyon metodudur. Bu yöntemle nükleik asitlerin kendi hücresel ortamlarında görüntülenmeleri sağlanır.

İn situ hibridizasyon tekniği hücre ve doku kesitlerine, yaymalara ya da mitozda dağılmış kromozomlara doğrudan uygulandığında in situ hibridizasyon adını alır. Bu yöntem hücrede özgül bir DNA dizisi (bir gen ya da genin bir bölümü) bulunması durumunda, özgül bir genin okunduğu hücrelerin hangileri olduğunu belirlemek ya da özgül bir kromozomda bulunan bir genin yerini saptamak için idealdir.

Uygun koşullar altında, tek iplikli nükleik asit moleküllerinin tamamlayıcı dizileri ile eşleştirilerek hibrit moleküller oluşturulması temeline dayanan bu yöntem ile DNA veya RNA molekülleri üzerindeki dizilerin belirlenmesi sağlanır. Histolojik dokularda hedef mRNA’nın işaretlenmiş nükleik asit probuyla hibridizasyonu sağlanarak dengeli hibridler oluşturulur ve bu sayede probun yerinin görünür olması sağlanırken, sitolojik preparatlarda; DNA dizilerinin veya genlerin kromozomlar üzerinde direkt yerleşimine olanak tanır. Bu yöntemle ayrı türlerdeki hücre gruplarındaki gen anlatımı çalışmalarında kesin çıkarımlar yapmak mümkündür.

Günümüzde toksikolojik çalışmalarda, kanser araştırmalarında ve kromozom anomalilerinin tespitinde genetik tanı yöntemi olarak tercih edilen ve moleküler genetik analizler çok daha hassas olan bu teknik ile minimal rezidüel hastalık (MRD) durumunu saptamak da mümkün olabilir.

Anahtar Kelimeler: Moleküler Yöntem, İn Situ, FISH