LİGNOSELÜLOTİK YAPININ HİDROLİZİNDE RUMEN FUNGUSLARININ KARBONHİDRAT AKTİF – ENZİM (CAZyme) ETKİSİ


Yücel H., Ekinci K., Karaman A.

ISPEC 9th INTERNATIONAL CONFERENCE on AGRICULTURE, ANIMAL SCIENCES and RURAL DEVELOPMENT, Burdur, Türkiye, 19 - 20 Mart 2022, ss.1060-1070

  • Yayın Türü: Bildiri / Tam Metin Bildiri
  • Basıldığı Şehir: Burdur
  • Basıldığı Ülke: Türkiye
  • Sayfa Sayıları: ss.1060-1070
  • Atatürk Üniversitesi Adresli: Evet

Özet

Karbonhidrat Aktif Enzim (CAZyme) sistemi karbonhidratların sahip olduğu glikozidik bağlar üzerinde etkili olan bir yapıya sahiptir. Bu sistem içerisinde glikozit hidrolaz (GH) enzim ailesine üye olan selüloz ve hemisüloz (β 1-4 glikozit bağı) gibi karbonhidratların hidrolizinde görevli enzimlerde mevcuttur. Bu enzimlerin çoğu mikroorganizmalar tarafında sentezlenmesinden dolayı simbiyotik mikroorganizmalardaki CAZyme aktivitesinin önemi her geçen gün artmaktadır. Herbivor canlıların ana besin kaynağı olan bitkisel materyalin hücre duvarında β 1-4 glikozit bağları ile oluşan lignoselülotik yapı selüloz, hemiselüloz ve lignin gibi karbonhidratların birleşmesi sonucu oluşmuştur. Bu kompleks karbonhidrat rumen içersinde simbiyotik olarak bulunan bazı mikroorganizmalar sayesinde hidrolize olabilmektedir. Rumenin mikrobiyal ekositemde bakteri, arkea, protozoa, bakteriyofaj ve rumen fungusları mevcuttur. Rumen mikrobiyatasındaki canlılar içerisinde rumen fungusları glikozit hidrolaz etkinliğine sahip bir topluluktur. Özellikle β 1-4 glikosidaz (EC 3.2.1.4) ve β 1-4 ksilasidaz (EC 3.2.1.37) aktivitesi diğer mikroorganizmalara göre daha etkili olduğu düşünülmektedir. Bundan dolayı bu çalışmamızda rumen funguslarının (Neocallimastix sp.) CAZyme enzim etkinliğinin belirlenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada kullanılan karbonhidrat substraları olarak Avisel (mikrokristal selüloz), Karboksimetil Selüloz (Selüloz omurgasına metil eklenmiş selüloz türevi), Selüloz ve Hemiselüloz kullanılmıştır. Sonuç olarak β 1-4 ksilasidaz enzim etkinliğinin daha fazla olduğu dinitrosalisilik asit (DNS) yöntemi ile gösterilmiştir. Elde edilen bu sonuçlar özellikle ksilanaz (EC 3.2.1.37) etkinliği başta olmak üzere rumen funguslarının CAZyme aktivitesine sahip olduğu ve bu mikroorganizmaların CAZyme sisteminin kullanıldığı farklı edüstriyel alanlar için aday mikroorganizma olabileceği düşünülmüştür.

The Carbohydrate Active Enzyme (CAZyme) system has a structure that acts on the glycosidic bonds of carbohydrates. In this system, there are enzymes involved in the hydrolysis of carbohydrates such as cellulose and hemisulose (β 1-4 glycoside bonds), which are members of the glycoside hydrolase (GH) enzyme family. Since most of these enzymes are synthesized by microorganisms, the importance of CAZyme activity in symbiotic microorganisms is increasing day by day. The lignocellulotic structure, which is formed by β 1-4 glycoside bonds in the cell wall of the plant material, which is the main food source of herbivores, is formed as a result of the combination of carbohydrates such as cellulose, hemicellulose and lignin. This complex carbohydrate can be hydrolyzed by some microorganisms symbiotically present in the rumen. There are bacteria, archaea, protozoa, bacteriophage and rumen fungi in the microbial ecosystem of the rumen. Among the organisms in the rumen microbiota, rumen fungi are a community with glycoside hydrolase activity. Especially β 1-4 glycosidase (EC 3.2.1.4) and β 1-4 xylasidase (EC 3.2.1.37) activities are thought to be more effective than other microorganisms. Therefore, in this study, it was aimed to determine the CAZyme enzyme activity of rumen fungi (Neocallimastix sp.). Avisel (microcrystalline cellulose), Carboxymethyl Cellulose (cellulose derivative with methyl added to the cellulose backbone), Cellulose and Hemicellulose were used as the carbohydrate substrates used in the study. As a result, it has been shown by the dinitrosalicylic acid (DNS) method that the β 1-4 xylasidase enzyme activity is higher. These results suggest that rumen fungi, especially xylanase (EC 3.2.1.37) activity, have CAZyme activity and these microorganisms may be candidate microorganisms for different industrial areas where the CAZyme system is used.