İnsan Karbonik Anhidraz IX İzoenziminin Klonlanması, Üretilmesi, Antitümör İlaçların ve Bazı Kimyasalların Enzim Aktivitesi Üzerine Etkilerinin İncelenmesi,

---

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2012

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Emrah YERLİKAYA

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ömer İrfan KÜFREVİOĞLU

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada CA IX izoenzimi, insan pankreas dokusundan rekombinant DNA teknolojisi kullanılarak Escherichia coli (BL21DE3) hücresinde üretildi. hCA IX izoenzimi Nikel- nitrilotriasetik asit afinite kromatografisi kullanılarak 290378 EUxmg-1 spesifik aktiviteyle; %85,96 verimle; 20,4 saflaştırma katsayısıyla saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin saflığını kontrol etmek ve molekül kütlesini tespit etmek amacıyla SDS-poliakrilamid jel elektroforezi yapıldı ve tek bant elde edildi. hCA IX izoenziminin molekül kütlesi 50,47 kDa olarak belirlendi. Ayrıca saflaştırılan hCA IX izoenziminin karakterizasyonu yapılarak enzimin optimum iyonik şiddet, optimum pH, optimum sıcaklık, stabil pH, Km, Vmax ve kcat değerleri belirlendi. 25 adet antitümör ilacın ve 6 adet ağır metalin enzim aktivitesi üzerine etkisi esteraz aktivitesi metodu kullanılarak in vitro şartlarda araştırıldı. İnhibitör etkisi gösteren ilaç ve metallerin IC50 değerleri hesaplandı. Enzimi inhibe eden antitümör ilaçlar için ayrı ayrı Lineweaver-Burk grafikleri çizilerek Ki değerleri ile inhibisyon tipleri belirlendi.