Withaferin A'nın hepatoselüler kanser hücrelerinde periostin üzerine etkisinin in vitro olarak araştırılması
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, HİSTOLOJİ VE EMBRİYOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2023
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: SALTUK BUĞRA KARAHAN
Danışman: Tuba Demirci
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Amaç: Hepatoselüler kanser (HSK) dünyada sık rastlanan kanserlerden biridir ve dünya çapında kanserle ilişkili ölümlerin en yaygın nedenleri arasındadır. Withaferin A antikanser vitanoliddir ve antienflamatuar, immüno-modülatör, anti-metastaz ve anti-kanserojen etkilere sahiptir. Withaferin A, sağlıklı dokulara toksisitesi düşük olan bir antikanser ajandır ve dirençli kanser hücrelerini mevcut kemoterapötik ajanlara duyarlı hale getirir. Periostin, hücre proliferasyonu, hücre invazyonu ve anjiyogenez gibi birçok temel biyolojik süreçte yer alan bir proteindir ve epitelyal-mezenkimal geçiş (EMG)'de önemli rol oynamaktadır. Çalışmamızda Withaferin A'nın hepatoselüler kanser üzerindeki etkisi ve bu etkinin periostin, Akt ve pAkt ile olan ilişkisinin araştırılması amaçlandı. Materyal ve Metot: HepG2 hücre hattında MTT testi ile hücre viabilitesi belirlendikten sonra hepatoselüler kanser hücreleri platelere ekildi. Konfluent olduktan sonra hücreler kontrol, 24 ve 48 saatlik gruplar şeklinde ayrıldı. Gruplara belirlenen dozlarda (2 µM ve 4 µM) Withaferin A uygulandı, kontrol grubuna ise Withaferin A uygulaması yapılmadı. Yara çizik deneyi ile hücrelerin proliferasyonu ve migrasyonu değerlendirildi. Moleküler olarak Real-Time PCR ile periostin (Postn), Akt1 ve pAkt1'in gen ekspresyon düzeyi analiz edildi ve immünositokimyasal olarak da bu proteinlerin ekspresyonu belirlendi. Elde edilen veriler istatistiksel olarak analiz edildi. Bulgular: Yara çizik deneyinde Withaferin A'nın hücre proliferasyonu ve migrasyonunu önlediği belirlendi. Withaferin A'nın kanser hücrelerinin çoğalmasını azalttığı ve sıfırıncı saatten başlayarak kırk sekizinci saate doğru kontrol grubunda yara alanının kapandığı ve Withaferin A uygulanan gruplarda ise yara alanının kapanmadığı tespit edildi. Hem moleküler hem de immünositokimyasal analizlerde de Withaferin A uygulanan gruplarda periostinin ekspresyonunun azaldığı ve bu azalmalara Akt1 ve pAkt1'in eşlik ettiği belirlendi. Sonuç: Withaferin A'nın periostini baskılayarak hepatoselüler kanser hücrelerinde proliferasyon ve migrasyonu azalttığı, bu etkide periostin ile Akt1ve pAkt1 arasındaki etkileşimin rol oynadığı belirlendi. Sonuç olarak Withaferin A'nın hepatoselüler kanser vakalarında tedavi edici etkisi olabileceği düşünüldü. Anahtar Kelimeler: Akt1, Hepatoselüler kanser, pAkt1, Periostin, Withaferin A