Bacillus invictae ve Lactobacillus kefiri' den mannanaz ve fitaz enzimlerinin kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Tarımsal Biyoteknoloji Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2021
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ŞEYMA ALIM
Danışman: Neslihan Dikbaş
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Amaç: Stok kültürden alınan 15 farklı bakterinin fitaz ve mannanaz enzimlerini üretebilme yeteneklerinin belirlenmesi, bu bakterilerden yüksek enzim aktivitesine sahip olanların seçilerek fitaz ve mannanaz enzimlerinin kısmi saflaştırılması, ZnO nanopartiküllerine immobilize edilerek serbest haldeki enzimlerle (fitaz, mannanaz) karşılaştırılması ve endüstriye kazandırılabilirliğinin araştırılması amaçlanmaktadır. Yöntem: Test edilen 15 farklı bakteri geliştirildikten sonra bakterilerin mannanaz ve fitaz enzim aktiviteleri belirlenmiştir. En iyi aktivite gösteren iki bakteri seçilmiştir. Bu bakterilerden mannanaz ve fitaz enzimleri kısmi saflaştırılmış ve çinko oksit (ZnO) nanopartiküllerine immobilize edilmiştir. İmmobilizasyonun varlığını kontrol etmek amacıyla, FTIR, SEM ve XRD ölçümleri yapılmıştır. İmmobilize ve serbest enzimlerin optimum pH ve sıcaklık değerleri belirlenmiştir. Bulgular: En iyi fitaz ve mannanaz aktivitesi gösteren bakteriler sırasıyla L. kefiri (10.217 EU/mL) ve B. invictae (0,461 EU/mL) olarak belirlenmiştir. L.kefiri ve B. invictae' den kısmi olarak saflaştırılan serbest ve immobilize (ZnO) fitaz ve mannanaz enzimlerinin optimum pH ve sıcaklık değerleri sırasıyla pH 5 ve pH 6-7; 70-80 ºC ve 40-50 ºC olarak belirlenmiştir. İmmobilize enzimlerin karakterizasyonu FTIR, SEM ve XRD ile yapılmış ve immobilizasyonun başarılı olduğu sonucuna varılmıştır. Sonuç: Her iki bakteri tarafından salgılanan enzimlerin asidik ve nötr pH'ya yakın ve yüksek sıcaklıkta kararlı bir yapıda olduğu, fitaz ve mannanaz enziminin ZnO nanopartikülüne immobilizasyonunun başarılı bir şekilde gerçekleştirildiği belirlenmiştir. Her iki enziminde endüstriyel uygulamalarda çeşitli biyoproseslerde kullanılabilme potansiyeline sahip olduğu belirlenmiştir. Anahtar Kelimeler: Bakteri, Kısmi Saflaştırma, Fitaz, Mannanaz, İmmobilizasyon