Mitokondriyal Dinamiklerdeki Değişimlerin Kanser İndüklü M2 Makrofaj Polarizasyonundaki Etkisi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Tıp Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı Başkanlığı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2025
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: BARAA MEHYO
Danışman: Osman Nuri Keleş
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Amaç: Bu çalışmada, akut monoblastik lösemi hücre hattı (THP-1) ve küçük hücreli akciğer kanseri (H446) hücre hatlarının ko-kültüründe, makrofajlarda MFN-2 (mitofusin-2) gen ifadesi siRNA ile baskılanarak makrofajlarda meydana gelen mitokondriyal dinamiklerdeki değişimler ve bu değişimlerin M1 ve M2 makrofaj polarizasyonu ve fonksiyonları üzerine etkileri araştırıldı. Materyal ve Metot: THP-1 kaynaklı M0 makrofajları siKontrol (monokültür), siMFN-2 (monokültür siMFN-2) , ko-kültür ve ko-kültür siMFN-2 gruplara ayrıldı. Ko kültür ve ko-kültür siMFN-2 gruplarındaki M0 makrofajlar H446 hücreleri ile indirekt kültür edildi. Aynı zamanda ko-kültür siMFN-2 ve monokültür siMFN-2 gruplarındaki M0 makrofajlarda siRNA ile MFN-2 geni knockdown edildi. M0, M1 ve M2 makrofaj polarizasyonları CD14, CD86 ve CD206 gen ekspresyonları ölçülerek belirlendi. Makrofajlardaki mitokondriyal dinamiklerdeki yönelimler MFN-2 ve Drp1 ekspresyonları ve immünfloresan boyama ile belirlendi. Makrofaj polarizasyonu ile ilgili sitokinler olan TNF-α ve IL-10 seviyeleri ELİSA yöntemi ve inflamatuar proteinler olan TLR-4 ve NLRP6 gen ekspresyonları RT-PCR ile analiz edildi. Bulgular:. MFN-2 geninin siRNA yöntemi ile baskılandığı M0 hücrelerde M2 markeri olan CD206 ekspresyonun azaldığı ve M1 markeri olan CD86 ekspresyonun arttığı gözlemlendi. Ayrıca H446 hücreleri ile yapılan ko-kültürde M0 hücrelerinin CD206 ekspresyonunun büyük oranda arttığı ve CD86 ekspresyonunun azaldığı gösterilmiştir. MFN-2 knockdown yapılmış M0 hücrelerinin H446 hücreleri ile kokültür edilmesinde ise M1 polarizasyonunun arttığı ve M2 polarizasyonunun azaldığı tespit edildi. Sonuç: Çalışmamız kanser mikroçevresindeki makrofajlarda mitokondriyal fisyon aracılığıyla M0'dan M1'e fenotip değişimde literatürde daha önce tanımlanmayan yeni bir mekanizma ortaya koymaktadır. Ayrıca, KHAK mikroçevresindeki immün yanıtların modülasyonu için MFN-2'nin potansiyel bir tedavi seçeneği olabileceğini vurgulanmaktadır. Anahtar Kelimeler: H446, makrofaj polarizasyonu, mitokondriyal dinamikler, THP-1