NADPH-NADP+ Kullanan Bazı Enzimlerin Keçi Karaciğerinden Saflaştırılması, Karakterizasyonu, Enzim Aktivitesi Üzerine Bazı İlaçların ve Kimyasalların İnhibisyon Etkilerinin İncelenmesi

---

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2018

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Muhammet Serhat ÖZASLAN

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ömer İrfan KÜFREVİOĞLU

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada keçi karaciğer dokusundan glukoz-6-fosfat dehidrogenaz (G6PD), 6-fosfoglukonat dehidrogenaz (6PGD) ve glutatyon redüktaz (GR) enzimleri 2′,5′-ADP Sepharose 4B afinite kromatografi kullanılarak tek basamakda saflaştırıldı. Enzimlerin saflık dereceleri ve alt birimlerinin molekül kütleleri sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) ile gösterildi. Alt molekül kütleleleri GR için 61,3 kDa, 6PGD için 51,4 kDa ve G6PD için 63,1 kDa olarak bulundu. Jel Filtrasyon kromatografisi ile doğal hallerinin molekül kütleleri de sırasıyla 125,89 kDa, 100,02 kDa ve 63,09 kDa olarak belirlendi. Kinetik çalışmalar neticesinde, enzimler için optimum pH, iyonik şiddet, stabil pH, optimum sıcaklık ve substratlar için KM ve Vmax değerleri tespit edildi. Bunlara ilaveten, küçük baş hayvanlarda kullanılan Amoksisilin, Ampisilin, Neomisin, Oksitetrasiklin, Penisilin G, Sülfadimidin ve Tilozin gibi bazı ilaçların söz konusu enzim aktiviteleri üzerinde in vitro olarak belirlendi ve Ki değerleri 0,08 ± 0,03; 15,24 ± 2,97 mM aralığında inhibe etkileri hesplandı.