Aeribacillus pallidus (P26) bakterisinden peroksidaz enziminin saflaştırılması ve kinetiğinin araştırılması

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Moleküler Biyoloji ve Genetik Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2013

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Parham TASLIMI

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ahmet ADIGÜZEL

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Peroksidaz (POD; EC 1.11.1.7), akseptör olarak rol yapan hidrojen peroksitin ve hidrojen atomlarının donörü olarak görev alan, başka bir bileşiğin de bulunduğu bir reaksiyonu katalize eden bir oksidoredüktazdır. Bu çalışmada peroksidaz enzimi (POD), Erzurum-Pasinler kaplıcasından izole edilen termofilik Aerobacillus pallidus'dan (P26) (Gen bank no:EU935591) ekstraselüler olarak üretilmiş, amonyum sülfat çöktürmesi, CM-Sephadeks iyon değişim kromatografisi ve Sephakril S200 jel filtrasyon kromotografisi yöntemleri ile saflaştırılmıştır. Karakterizasyon çalışmalarında 4-metil katekol, H?O?, ABTS, pirogallol substrat çiftleri kullanılarak her bir substrat için ayrı ayrı optimum pH ve sıcaklık değerleri sırasıyla 7.0, 60°C belirlenmiştir. Bu çalışmada en iyi aktivite veren pirogallol substratı kullanılarak stabilite pH ve sıcaklık değerleri tespit edilmiştir. Ayrıca her bir substrat için Lineveawer-Burk grafiklerinden yaralanılarak Km ve Vmax değerleri ayrı ayrı hesaplanmıştır. Bunun yanında çalışmalarımızda peroksidaz enzimi aktivitesi üzerine etki eden bazı metal iyonları incelenmiştir. Enzimin molekül kütlesi 31 kDa olarak bulunmuştur. Bu işlemde ilgili enziminin bazı tekstil boyalarının atık sularda giderilmesi işlemini nasıl etkilediği incelenmiştir. Elde edilen bulgulardan saflaştırılan ve karakterize edilen peroksidaz enziminin katalaz-peroksidaz sınıfına ait olduğu tespit edilmiştir.