Çay Yapraklarından (Camellia sinensis L.) Polifenol Oksidaz Enziminin Afinite Kromatografisi İle Saflaştırılması, Karakterizasyonu ve Bazı Kimyasalların Enzim Aktivitesi Üzerine Etkisinin İncelenmesi

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2016

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Cansu YILMAZ

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ömer İrfan KÜFREVİOĞLU

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Polifenol oksidaz enzimi sebze ve meyvelerde kararmaya neden olur. Bu çalışmada, bu enzim Rize yöresinden toplanan çay yapraklarından (Camellia sinensis L.) Sepharose 4B-L-tirozin-p-aminobenzoik asit afinite kolonu kullanılarak ilk kez saflaştırıldı. Enziminin saflığını kontrol etmek için sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezi uygulandı. Katekol ve 4-metil katekol substratları kullanılarak, PFO enziminin optimum pH, optimum sıcaklık, optimum iyonik şiddet, stabil pH, KM ve Vmax değerleri belirlendi. Enzimin iki ayrı substrat için sırasıyla optimum pH'sı 9,0-8,5, optimum sıcaklığı 10°C, optimum iyonik şiddeti 0,05 M, stabil pH'sı 5,5, KM değeri 3,782-3,881 mM, Vmax değeri 1,676-1,912 µmol/dk olarak belirlendi. İnhibitör çalışmalarında substrat olarak katekol kullanılarak, sodyum metabisülfit, sodyum sülfit, ditiyoeritritol, glutatyon, askorbik asit inhibitörleri ile çalışıldı. Bu inhibitörler için beş farklı inhibitör konsantrasyonunda IC50 değerleri belirlendi. Lineweaver-Burk grafikleri yardımıyla bu inhibitörler için Ki sabitleri ve inhibisyon türleri belirlendi. Ki sabitleri ve IC50 değerlerine göre en etkili inhibitörün sodyum metabisülfit olduğu tespit edildi.