Laktoperoksidazın İmmobilizasyonu İçin Nişasta@metal oksit Biyonanofilmlerinin Sentezi, Karakterizasyonu ve Laktoperoksidaz İmmobilize Nişasta@metal oksit Biyonanofilmlerinin Antibakteriyal Potansiyelinin Araştırılması
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Fakültesi, Kimya, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2024
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: SONGÜL BAYRAK
Danışman: Hasan Özdemir
Özet:Amaç: Laktoperoksidaz (LPO), antibakteriyel, antiviral, antioksidan ve antitümör ajan olarak işlev gören bir peroksidaz enzimidir. LPO'nun stabilizasyonunun sağlanması endüstriyel uygulamalarda oldukça önemlidir. LPO'nun kararlılığını ve antimikrobiyal aktivitesini artırmak için kolay ve etkili bir yöntem geliştirmek amaçlandı. Bu nedenle, bu çalışmada, Nişasta, Nişasta@MgO, Nişasta@ZnO, Nişasta@CuO filmleri hazırlanarak, bu filmler üzerine LPO enziminin immobilizasyonu gerçekleştirildi. Yöntem: ZnO ve CuO NP'ü çöktürme yöntemi ile sentezlenirken MgO NP'ü Taguchi yöntemi ile sentezlendi ve daha sonra nişasta filmleri hazırlandı. Hazırlanan filmlere afinite kromatografisi ile saflaştırılan LPO enzimi tutuklama ve yüzey adsorbsiyonu olmak üzere iki farklı yöntemle immobilize edildi. Elde edilen Nişasta@(CuO, MgO, ZnO) Nişasta@(CuO, MgO, ZnO)/LPO filmlerin yüzey kimyasal yapı analizi, morfolojik incelemeleri ve kristal yapı analizlerini karakterize etmek için XRD, F-TIR ve SEM cihazları kullanıldı. Ayrıca hazırlanan filmlerin optimum pH, optimum sıcaklık ve termal kararlılığı, yeniden kullanılabilirliği ve depolama kararlılığı belirlendi. Son olarak filmlerin antibakteriyal etkisi incelenerek potansiyel olarak kullanılabilirliği belirlendi. Sonuç: Laktoperoksidaz (LPO) enziminin Nişasta ve Nişasta@ (CuO, MgO, ZnO) filmlerine immobilizasyonu, Fourier dönüşümü kızılötesi spektroskopisi (FT-IR), X-ışını difraksiyonu (XRD) ve alan emisyonlu taramalı elektron mikroskobu (FE-SEM) kullanılarak doğrulandı. İmmobilize edilen LPO'nun optimum sıcaklığı, pH 6'da serbest LPO'ya göre yaklaşık 20 °C artarak 60 °C olarak gözlemlendi. Filmlere immobilize edilen LPO, 4°C ve 25 °C'de 21 gün boyunca aktivitesini korurken, serbest enzim bu süre içerisinde ilk aktivitesinin %95'ini kaybetttiği gözlemlendi. Ayrıca, filmlere immobilize edilen LPO'nun 60 °C'de 60 dakika sonra başlangıç aktivitesini, yaklaşık %16,5-%19 arasında koruduğu belirlenirken, serbest enzimin 5 dakika sonra aktivitesini kaybettiği gözlenmlendi. Immobilize edilen LPO'nun, aktivite kaybı olmaksızın tekrar tekrar kullanılabilir özellikte olduğu gösterildi. Hazırlanan filmlere LPO enzimi immobilize edildikten sonra antibakteriyel etkisi gözlemlendi ve bu sentezlenen filmler arasında Nişasta@ZnO/LPO filminin en etkili antibakteriyel özellik gösterdiği belirlendi. Nİsan 2024, 98 Sayfa Anahtar Kelimeler: Laktoperoksidaz (LPO), İmmobilizasyon, Nişasta, Nanopartikül (NP), Antibakteriyel