Ağrı Diyadin kaplıcasından izole edilen termofilik Brevibacillus sp. (Z1) bakterisinden lakkaz enziminin saflaştırılıp, karakterize edilmesi ve endüstride kullanılabilirliğinin araştırılması
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Moleküler Biyoloji ve Genetik Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2014
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: Ceyda BOZOĞLU
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ahmet ADIGÜZEL
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Bu tezde, Ağrı/Diyadin kaplıcasından izole edilen, konvensiyonel ve moleküler yöntemler kullanılarak karakterize edilen Brevibacillus sp. (Z1) (Gen Bank No:KC292196.1) bakterisinden ekstraselüler lakkaz enzimi sırasıyla; amonyum sülfat çöktürmesi, DEAE sefadeks iyon değişim kromatografisi ve sephadeks G100 jel filtrasyon kromatografisi basamakları kullanılarak saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin optimum pH, optimum sıcaklık, Vmax-Km değerleri, ayrıca sıcaklık ve pH stabiliteleri belirlendi. Enzimin ABTS, 2,6-dimetoksifenol ve guaikol substratlarına karşı substrat spesifikliği belirlendi. Enzim üzerine Ca2+, Mg2+, Hg2+, Mn2+, Na+, Zn2+, Cu2+, Cd2+, Co2+ ve Fe2+ gibi bazı metal iyonlarının ve EDTA, sodyum azid, dithioeritritol ve SDS gibi bazı kimyasalların etkisi araştırıldı. Saflaştırılan lakkaz enziminin endüstriyel süreçlerde ve de çevresel atıkların biyolojik olarak yıkımında kullanılabilirliğinin araştırılması amacıyla ticari olarak satılan ve tekstilde kullanılan bazı boyaların enzimatik olarak dekolorizasyonu çalışıldı.Gerçekleştirilen deney sonucunda elde edilen verilere göre; lakkaz enziminin optimum pH'sı 4.0, optimum sıcaklığını 60oC, molekül ağırlığı 122.02, 93.756 ve 73.790 kDa büyüklüğünde, 3 alt birimden oluştuğu tespit edildi. ABTS ve 2,6-dimetoksifenol substratları için Vmax değerleri sırasıyla 14.08 EU/mL.dak., 16.12 EU/mL.dak., Km değerleri ise ABTS, 2,6-dimetoksifenol substratları için sırasıyla 5.34 mM ve 3.03 mM olarak hesaplandı. Brevibacillus sp. (Z1)'den ekstraselüler olarak üretilip saflaştırılan lakkaz enzimini kullanarak çevre kirliliğine sebep olan Reaktif Siyah 5, Fuksin, Allura Kırmızısı ve Asit Kırmızısı 37 gibi bazı tekstil boyalarının giderilmesinde kullanılabilirliği araştırıldı. Enzimin Reaktif Siyah 5, Fuksin, Allura Kırmızısı ve Asit Kırmızısı 37 boyalarının 3 saat sonunda %66.0, %50.8, %53.6 ve %47.3 oranında azalttığı belirlendi. Anahtar Kelimeler: Lakkaz, Moleküler karakterizasyon, Brevibacllus sp., Dekolorizasyon, Saflaştırma, Karakterizasyon