Alabaş turpu peroksidaz enziminin 3-amino benzohidrazid türevleri kullanılarak afinite kromatografisi ile saflaştırılması

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Fakültesi, Kimya, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2019

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: AHMET AKKAŞ

Danışman: Hasan Özdemir

Özet:

Bu tez çalışmasında 3-amino benzohidrazid türevleri olan; 3-amino-5-metil benzohidrazid, 3-amino-5-metoksi benzohidrazid, 3-amino-4-metil benzohidrazid, 3-amino-4-metoksi benzohidrazid, 3-amino-5-bromo benzohidrazid molekülleri sentezlenerek Alabaş turpunda (Kohlrabi Radish) POD enziminin saflaştırılması yapıldı. Sentezlenen moleküllerin Alabaş turpu POD enzimi üzerine inhibisyon etkileri incelendi ve dönüşümlü inhibisyon gösteren moleküller, enzimin saflaştırılmasında Sepharose-4B-L-Tirozin jel materyalinin ligandı olarak kullanıldı. Alabaş turpu POD enzimi, 3-Amino-5-metil benzohidrazid molekülü kullanıldığında %28,8 verimle 1192,3 kat, 3-amino-5-metoksi benzohidrazid ile %68,4 verimle 1060,6 kat, 3-amino-4-metil benzohidrazid %24,07 verimle 1085,3 kat, 3-amino-4-metoksi benzohidrazid %46,9 verimle 341,1 kat, 3-amino-5-bromo benzohidrazid ile %32 verimle 610,3 kat saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin saflık dereceleri ve molekül ağırlıkları SDS-PAGE ile belirlendi. Alabaş turpu POD enziminin molekül ağırlığı 47 kDa da olarak bulundu. Bütün kolonların saflaştırma sonuçlarına bakıldığında Alabaş turpu POD enzimi saflaştırılmasında en iyi kolon materyali sepharose-4B-L-Tirozin 3-amino-5-metil benzohidrazid kolonu olarak belirlendi.