Bazı Flavonoidlerin Antioksidan Kapasitelerinin Belirlenmesi ve İnsan Eritrositlerinden Saflaştırılan Glutatyon S-Transferaz Enzim Aktivitesi Üzerine İnhibisyon Etkilerinin İncelenmesi


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2016

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Mine AKSOY

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ömer İrfan KÜFREVİOĞLU

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu tez kapsamında baicalin, baicalein ve phloridzin flavonoidlerinin antioksidan kapasiteleri incelendi. Çalışmada kullanılan flavonoidlerin antioksidan kapasitesini ölçmek için demir indirgeme aktivitesi, kuprik iyonları (Cu+2) indirgeme aktivitesi, FRAP metoduna göre ferrik iyonları (Fe+3) indirgeme aktivitesi, 1,1-difenil-2-pikril-hidrazil serbest radikalini (DPPH·) giderme, 2,2´-azino-bis(3-etilbenztiyoazolin-6-sülfonik asit) radikalini (ABTS∙+) giderme aktivitesi yöntemlerinden yararlanıldı. Sonuçların mukayese edilmesinde bütillenmiş hidroksianisol (BHA), bütillenmiş hidroksitoluen (BHT), α-tokoferol ve troloks standart antioksidanları kullanıldı. Ayrıca baicalin, baicalein ve phloridzin flavonoidlerinin bir detoksifikasyon enzimi olan ve metabolik öneme sahip glutatyon S-transferaz (GST) enzim aktivitesi üzerine in vitro inhibisyon etkileri araştırıldı. Çalışmada kullanılan GST enzimi için kaynak olarak insan eritrositleri kullanıldı. İnsan eritrositlerin GST enzimi glutatyon-agaroz afinite kolonu yardımıyla 3,309 EÜ/mg protein spesifik aktiviteyle 1140 kat saflaştırıldı. Enzimin saflığı sodyumdodesilsülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) ile kontrol edildi. Saflaştırılan enzim üzerine baicalin, baicalein ve phloridzin flavonoidlerinin inhibisyon etkilerini incelemek amacıyla önce beş farklı inhibitör konsantrasyonunda enzim aktivitesi ölçüldü ve % Aktivite-[İnhibitör] grafiği çizildi. Enzim aktivitesini yarıya düşüren inhibitör konsantrasyonu olan IC50 değerleri çizilen bu grafik yardımıyla sırasıyla 0,028; 0,056; 0,769 mM olarak hesaplandı. Enzim inhibitör ayrışma sabiti olan Ki değerleri ise sırasıyla 0,0145; 0,024; 0,762 mM olarak bulundu.