Soya fasülyesinden (Glycine max L. Merrill) tekniği kullanılarak peroksidaz enziminin saflaştırılması ve bazı kinetik özelliklerinin incelenmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2022

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: ZAHRA RASULZADE

Danışman: Hasan Özdemir

Özet:

Peroksidaz (POD) enzimleri üzerine çeşitli saflaştırma prosedürleri bulunmaktadır. Önceki çalışmalarda 4-aminobenzohidrazid türevleri peroksidaz enzimlerinin etkili inhibitörlerinin olarak tanımlanmış ve 4-aminobenzohidrazid türevi moleküller tabanlı afinite kromatografisi tekniği kullanılarak POD enziminin saflaştırılması yapılmıştır. Bu tez kapsamında, Soya fasülyesi peroksidaz (SBP) enzimi üzerine 4-amino-3-bromo-5-florobenzohidrazid,4-amino-3-bromo-5-klorobenzohidrazid, 5-amino-izoftalohidrazid, 4-amino-3-bromo-2-metilbenzohidrazid moleküllerinin inhibisyon etkileri araştırılacak ve inhibisyon etkisi gösteren türevlerden afinite jelleri hazırlanarak SBP enzimini tek kademede saflaştırılacaktır. Afinite kromotografi tekniğiyle SBP enziminin tek basamakta saflaştırılması, bu saflaştırmanın daha az zamanda, uygun maliyyetde ve yüksek verimde gerçekleştirilmesi, ticari kullanımada ışık tutacaktır. Bu tez çalışmasında ilk olarak 4-amino-3-bromo-5-florobenzohidrazid,4-amino-3-bromo-5-klorobenzohidrazid, 5-amino-izoftalohidrazid, 4-amino-3-bromo-2-metilbenzohidrazid moleküllerinin Ki ,IC50 değerleri belirlenecek ve Sepharose-4B matriksi kullanılarak inhibisyon gösteren maddeler için Afinite jeli hazırlanacaktır. Hazırlanan afinite jellerinden SBP enzimi tek kademede saflaştırılacaktır. Saflaştırmada kullanılma potansiyeli olan en iyi afinite kolonlarına SBP enziminin bağlanma kapasitesi üzerine sıcaklığın, pH'nın ve iyonik şiddetin etkisi belirlenecektir.