Bazı Hasta Serumlarında, Sınav Stresi Olan Öğrenci Serumlarında ve Plevra Sıvısında Zn+2 Miktarının Apokarbonik Anhidrazın Tekrar Aktivasyonu İle Tayini

---

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 1991

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Nazan DEMİR

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ömer İrfan KÜFREVİOĞLU

Özet:

ÖZET Bu çalışmada, bazı vücut sıvılarında eser miktarda bulunan Zn+2'nin kantitatif tayini için, geliştirilen enzimatik bir yöntem, modifîye edilerek bazı hastalık gruplarına ve plevra sıvısına uygulanmıştır. Apokarbonik anhidrazın enzimatik aküvitesmi çözeltideki Zn+2 miktarıyla orantılı olarak tekrar kazanması, enzimatik yöntemimizin temel prensibini oluşturmuştur. önce, sığır karbonik anhidraz enzimi, eritrosit hemolizatmdan afinite kromatografisi ile saflaştırıldı. Saflaştırılmış enzimin bünyesindeki Zn+2'nin tamamı piridin-2,6-dikarboksilik asit çözeltisine karşı diyaliz edilerek uzaklaştırıldı. Böylece %100 saflıkta apoenzim elde edildi. Serum ve plevra sıvısında 2n+2 tayini yapabilmek için standart bir eğri hazırlandı. Bu eğrinin hazırlanmasında ve numunelerin değerlendirilmesinde, pnitroferul asetat substratının p-nitrofenol ve asetata parçalanmasının, yani karbonik anhidrazın esteraz aktivitesinin ölçümü esas alındı. Tayinlerde serum ve plevra sıvısı, bir ön işlemden geçirildikten sonra kullanıldı. Elde edilen sonuçlar, aynı numunelerin atomik absorbsiyonla ölçülen toplam Zn+2 miktarlarıyla karşılaştırıldı. Ayrıca sadece total protein çalışılan plevra sıvısı haricindeki diğer bütün serum numuneleri için, total protein ve albümin ölçümleri yapılmış ve Zn+2 miktarları ile arasındaki ilişki araştırılmıştır. Çalışılan 20 sağlıklı, 10 sirozlu, 12 diabetes mellituslu, 15 kronik böbrek, 101 sınav stresli öğrenci serumu ve 10 plevra sıvısı için apokarbonik anhidraz yöntemiyle bulunan X±SD değerleri sırasıyla, 123,4±20,8, 51,5±14,7, 115,6±21,7, 106,4±21,1, 97,9±19,7 ve 88,4+22,0 ug/100 ml'dir. Aynı sırayla atomik absorbsiyonla ölçülen Zn+2 değerleri ise ; 129,0±12,2, 51,0±14,1, 118,4±22,7, 106,8±22,3, 100,0±20,3, ve 90,0+22,0 ug/100 ml'dir. Bütün gruplar için enzimatik yöntem ve atomik absorbsiyon yöntemiyle elde edilen Zn+2 değerleri arasında korelasyon hesabı yapılarak, çok önemli derecede (P<0,001) korelasyon tespit edilmiştir. Bu sonuçlar, literatürdeki değerlerle karşılaştırılmış, yöntemimizin vücut sıvılarında kullanılabileceği kanaatine varılmıştır.