Sığır sütünden laktoperoksidaz (LPO) enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu, bazı ilaçlara karşı kinetik özelliklerinin belirlenmesi ve bazı patojen mikroorganizmalara karşı antibakteriyal ve antifungal etkisinin incelenmesi

---

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Fakültesi, Kimya, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2004

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: METİN TANSU UĞUZ

Danışman: Hasan Özdemir

Özet:

ÖZET Doktora Tezi SIĞIR SÜTÜNDEN LAKTOPEROKSÎDAZ (LPO) ENZİMİNİN, SAFLAŞTIRILMASI, KARAKTERİZASYONU, BAZI İLAÇLARA KARŞI KİNETİK ÖZELLİKLERİNİN BELİRLENMESİ VE BAZI PATOJEN MİKROORGANİZMALARA KARŞI ANTİBAKTERİYAL VE ANTIFUNGAL ETKİSİNİN İNCELENMESİ Metin Tansu UĞUZ Atatürk Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Kimya Anabilim Dalı Danışman: Doç.Dr.Hasan ÖZDEMİR Bu çalışmada laktoperoksidaz enzimi (LPO) (E.C. 1.1 1.1.7) sağlıklı sığır sütünden, biyokimyasal ve kromatograflk yöntemler kullanılarak saflaştmlmış ve bazı kinetik özellikleri araştırılmıştır. Laktoperoksidaz enziminin sığır sütünden saflaştırılması amacıyla, Amberlite CG-50 H reçinesiyle kısmi saflaştırma yapılarak, CM-Sephadex C-50 iyon değişim kromatografisi, %0-90 amonyum sülfat çöktürmesi, Sephadex G-100 jel filtrasyon kromatografisi, diyaliz ve enzim saflığını kontrol etmek için SDS-PAGE elektroforez teknikleri kullanıldı. Bir litre sığır sütünden spesifik aktivitesi 20,81 EÜ/mg protein olan toplam 6,7 mg LPO elde edildi. ABTS substratı için Kn, ve Vmax değerleri belirlendi. Suda çözünebilen bazı antibiyotik ve anestezik maddelerin enzim üzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. ABTS ve H2O2 substratlan kullanılarak yapılan çalışmalarda, kullanılan ilaçların tamamının enzimi inhibe ettiği ve inhibisyon tipinin antibiyotikler için yarışmalı inhibisyon, anestezik maddeler için ise yanşmasız inhibisyon şeklinde olduğu bulundu. Kullanılan antibiyotiklerden Sefazolin ve Seftriakson'un enzimi yüksek oranda inhibe ettiği tespit edildi. Antibakteriyal ve antifungal çalışma, Disk-difUzyon yöntemi kullanılarak Müeller-Hinton Agar ortamında yapıldı. Bazı patojen bakteri suşları, fungus türleri ve klinikten izole edilen hastane enfeksiyonu etkenleri üzerinde LPO sisteminin etkisi incelendi. Antibakteriyal çalışmada bir çok bakteri susunun duyarlı olduğu fakat klinikten izole edilen bakterilerin daha dirençli oldukları anlaşılmıştır. Antifungal duyarlılık çalışmasında, 11 türden sadece Kluyveromyces fragilis ile Rodotorula rubra duyarlı, diğer türler ise dirençli bulunmuştur. 2004, 86 sayfa Anahtar kelimeler: Laktoperoksidaz, sefazolin, seftriakson, ketamin baz, marcain, inhibisyon, antibakteriyal, antifungal.