Melas ortamında Bacillus thuringiensis S301 ile laktik asit üretimi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Moleküler Biyoloji ve Genetik Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2021
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ŞENBA KOMESLİ
Danışman: Mesut Taşkın
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Amaç: Bu çalışmanın amaçları, lokal olarak izole edilen bakterilerin L-laktik asit üretme potansiyellerini araştırmak ve en yüksek potansiyele sahip izolattan melas bazlı ortamda laktik asit üretmek için bazı kültür koşullarını optimize etmekti. Yöntem: Bu çalışmada, Türkiye'nin farklı şehirlerinden toplanan toprak örnekleri hedeflenen bakterilerin izolasyon kaynağı olarak kullanıldı. İzolasyon çalışmaları anaerobik koşullar altında TSA ve MRS agar besiyerleri üzerinde gerçekleştirildi. İzolatların laktik asit üretme potansiyeli hem anaerobik hemde aerobik koşullar altında test edildi. En yüksek L-laktik asit üretme potansiyeline sahip izolatın moleküler tanımlaması, 16S rRNA sekans analizine göre gerçekleştirildi. Daha sonra, seçilen izolatın laktik asit üretme yeteneğini artırmak için farklı melas (50, 100, 150 ve 200 ml/lt) ve pepton (0, 1, 2, 3, 4 ve 5 gr/lt) konsantrasyonlarının yanısıra farklı pH' lar (4-10), sıcaklıklar (10-35°C), inokulum hacimleri (20, 60, 100, 140 ve 180 ml/lt) ve inkübasyon süreleri (24, 48, 72, 96 ve 120 saat) test edildi. Optimize edilmiş kültür koşulları altında, steril olmayan melas ortamında da üretim deneyleri gerçekleştirildi. Deneyler sırasında laktik asit analizleri GC/MS kullanılarak yapıldı. Bulgular: Farklı toprak örneklerinden toplam otuz beş bakteri suşu izole edildi. Bu izolatlardan yirmi tanesi melas içeren ortamda büyüme potansiyeli göstermedi. Geriye kalan on beş izolat arasında, S301 kodlu izolatın hem aerobik hem de anaerobik koşullarda en yüksek laktik asit üretme potansiyeline sahip olduğu belirlendi. Bu izolat Bacillus thuringiensis (GenBank Numarası: MZ520598) olarak teşhis edildi. B. thuringiensis S301'den laktik asit üretimi için optimum koşullar, 100 ml/lt melas konsantrasyonu, 3 gr/lt pepton konsantrasyonu, pH 9, 25°C sıcaklık, 140 ml/lt inokulum hacmi ve 96 saatlik inkübasyon süresi olarak belirlendi. Steril ortamda ve steril olmayan ortamda üretilen laktik asidin maksimum konsantrasyonları sırasıyla 36,2 ve 17,3 gr/lt olarak ölçüldü. Sonuç: Bu çalışmada, lokal olarak izole edilen B. thuringiensis S301'in melas bazlı ortamda yüksek verimle laktik asit üretebileceği ve kültür koşullarını optimize ederek bu bakterinin laktik asit üretim potansiyelinin artırılabileceği gösterildi. Bacillus thuringiensis türünün melas ortamında laktik asit üretme yeteneği ilk kez mevcut çalışmada araştırılmıştır. Anahtar Kelimeler: Bacillus thuringiensis, l-laktik asit, melas