Exiguobacterium acetylicum'un biyokimyasal ve bazı enzimatik özelliklerinin belirlenmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Ziraat Fakültesi, Tarımsal Biyoteknoloji, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2020

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Emre Canca

Danışman: Neslihan Dikbaş

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Amaç: Bu tez çalışmasında, atık sudan izole edilmiş Exiguobacterium acetylicum'un biyokimyasal karakterizasyonunun tespit edilmesi, kitinaz ve fitaz enzim aktivitelerinin belirlenmesi, kitinaz enziminin optimum aktivite gösterdiği sıcaklık ve pH değerlerinin belirlenmesi amaçlanmıştır. Yöntem: Prof. Dr. Neslihan Dikbaş Kültür Koleksiyonundan (ND 50) temin edilen E. acetylicum Nutrient Agar(NA) ve Nutrient Broth(NB) besiyerinde 37 °C'de 48 saat süre inkübe edilmiştir. E. acetylicum'un gelişme gösterdiği ekstrem koşullar belirlenmiştir. Bakterinin optimum süre ve sıcaklık değerleri belirlenmiş ve NB besiyerinde geliştirilmiştir. Bakterinin optimum düzeyde kitinaz enzimi ürettiği inkübasyon süresi ve besi ortamının belirlenmesi için NB'a sırasıyla %5, %10 ve %15 oranında kolloidal kitin varlığında her 6 saatte bir ölçüm yapılarak belirlenmiştir. Bakterinin fitaz enzimi üretme kabiliyeti de incelenmiştir. Son aşamada kitinaz enziminin optimum sıcaklık ve pH değerleri tespit edilerek değerlendirilmiştir. Bulgular: Biyokimyasal testler sonucu E. acetylicum, gram(+), katalaz (+), oksidaz (+), nişasta hidrolizasyon yeteneğine sahip olan, sütteki kazeini hidrolize edemeyen, indol(-), nitrat redüksiyon yeteneğine sahip olmayan ve yüksek şeker konsantrasyonlarına toleranslı bir bakteri olarak karakterize edilmiştir. Belirlenen optimum gelişim parametreleri ise 35°C, pH 7 ve % 2 tuzluluk olarak tespit edilmiştir. E. acetylicum'un kitinaz ve fitaz aktivitesi belirlenmiş ve optimum kitinaz aktivitesi 10g/L kolloidal kitinli NB besiyerinde 48. saatte belirlenmiştir. Kitinazın optimum sıcaklık ve pH değerleri ise 70°C ve 7.00 olarak belirlenmiştir. Sonuç: Tez çalışmasının sonucunda E. acetylicum'un kitinaz ve fitaz enzim aktivitesine sahip, ekstrem koşullarda gelişebilen dayanıklı bir bakteri türü olduğu belirlenmiştir. E. acetylicum'dan elde edilen kitinazın yüksek sıcaklık ve nötr pH değerinde optimum düzeyde aktivite gösterdiği belirlenmiştir. Endüstriyel uygulamalarda kullanım avantajı olabilecek, ekstrem özelliklere sahip bir bakteri karakterize edilmiştir. Anahtar Kelimeler: Exiguobacterium acetylicum, Kitinaz, Fitaz, Biyokimyasal Test, Enzim Aktivitesi