Lokal olarak izole edilen funguslarla kitin ve kitosan üretimi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Atatürk Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Moleküler Biyoloji ve Genetik Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2021

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: FATİH KAYAR

Danışman: Hakan Özkan

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Amaç: Mevcut çalışma lokal olarak izole edilen küflerden kitin üretmek, üretilen kitini kitosana dönüştürmek ve hazırlanan kitosanın biyolojik aktivitelerini (antimikrobiyal, antioksidan) belirlemek için gerçekleştirildi. Yöntem: Farklı çevrelerden toplanan toprak örnekleri dilüsyon metodu ile dilüe edildi ve hazırlanan dilüsyon örnekleri daha sonra melas bazlı agar besiyeri içeren petriler üzerine transfer edildi. Petriler 25°C'de 6 gün süreyle inkübe edildi. Gelişen küf izolatları alt kültüre alındı ve saflaştırıldı. İzolatlar kitin içerikleri bakımından tarandı ve en yüksek kitin içerikli izolat seçildi. Seçilen izolat 18S rRNA analizine göre teşhis edildi. En üretken izolattan kitin üretimini arttırmak için bazı kültür parametreleri (melas konsantrasyonu, pH, sıcaklık ve inkübasyon süresi) optimize edildi. İzolattan ekstrakte edilen kitin, deasetilasyon prosesi ile (sıcak su banyosunda %50 (w/v) NaOH ile 100 ˚C'de, 2 saat süreyle) kitosana dönüştürüldü. Hazırlanan kitosanın fonksiyonel grup analizi Fourier dönüşümlü kızılötesi spektroskopisi (FTIR) kullanılarak gerçekleştirildi. Hazırlanan kitosanın antimikrobiyal ve antioksidan aktiviteleri sırasıyla disk difüzyon yöntemi ve DPPH· metodu kullanılarak analiz edildi. Bulgular: Bu tez çalışmasında 35 küf farklı toprak örneklerinden izole edildi ve en yüksek kitin içerikli izolatın TZ18 kodlu izolat olduğu belirlendi. İzolat TZ18, Penicillium crustosum olarak teşhis edildi. Bu izolattan kitin üretimi için optimum pH, melas konsantrasyonu, sıcaklık ve inkübasyon süresi sırasıyla 6, 120 g/l, 25°C ve 5 gün olarak belirlendi. Optimal koşullar altında üretilen Penicillium crustosum TZ18 biyomasının kitin içeriği %26,4 olarak belirlendi. TZ18 Penicillium Kitosanının (PK) ve Ticari Kitosanın (TK) deasetilasyon dereceleri sırasıyla %78,3 ve 76,9 olduğu bulundu. TK'ya kıyasla PK'nın E. coli ve S. aureus bakterilerine karşı daha yüksek antimikrobiyal aktiviteye sahip olduğu bulundu. TK'nın aksine PK, DPPH· giderme aktivitesi göstermedi. Sonuç: Mevcut çalışmada ticari kitosana kıyasla Penicillium crustosum kitininden hazırlanan kitosanın daha yüksek antimikrobiyal aktiviteye sahip olduğu gösterildi. Penicillium crustosum ile kitin ve kitosanın üretimi ve hazırlanan kitosanın biyolojik aktivitesi ilk kez mevcut çalışmada test edildi. Anahtar Kelimeler: Kitin, Kitosan, Melas, Penicillium crustosum, Antimikrobiyal, Antioksidan